Etude des propriétés de la Polyphénol Oxydase de dattes de Phoenix dactyliferaL., variété Deglet Nour, de la région de Metlili- Ghardaïa

Abstract

La présente étude est consacrée à pour but de l'extraire la polyphénol oxydase (PPO) à partir de dattes de Phoenix dactylifera L., variété Deglet Nour, récolté de la région de Metlili et de déterminer certaines quelques propriétés biochimique. La polyphénol oxydase (EC: 1.14.18.1) a été, tout d'abord, extraite utilisant de tampon phosphate (0.1M, pH 6.8) et le PVP (0.5%). L'extrait brut d'enzyme est ensuite partiellement purifié par précipitation en utilisant le sulfate d'ammonium à 80%. les différents extraits enzymatiques brut et partiellement purifié possèdent une activité positive vis-à-vis la PPO qui est de 1.86 et 2.77 UE respectivement, en utilisant le pyrocatéchol comme substrat. L’influence de la concentration en pyrocatéchol sur l’activité enzymatique fait apparaitre une réponse Michaelienne avec des valeurs Vmax et Km égales 0.005 (UE/min.ml) et 0.055M respectivement. L'étude de la spécificité du substrat, de l’effet du pH et de la température, ont été effectuée. La PPO peut catalyser les mono-, di et triphénols avec une préférence variable. Desquels, l’acide caféique et le phénol ont été oxydés activement par la PPO. Il est remarquable que l'activité enzymatique soit maximale au voisinage de la neutralité, dont le pH optimal a été trouvé de 7.4 à une température 25°C en présence de pyrocatéchol. De même, l'étude de la stabilité thermique montre que la PPO est une enzyme qui n'est pas thermostable. Son activité diminue progressivement lorsqu'elle est incubée pendant 30 min aux températures supérieures à 30°C. Ainsi, la PPO est presque complètement inactivée à 80°C. L'inhibition de la PPO a été testée avec quelques composés chimiques. Dont une grande capacité inhibitrice a été montrée par ordre d'inhibition décroissante comme suit: l’acide ascorbique, l’acide citrique, l’acide oxalique et l’acide acétique. Une inhibition de type mixte a été obtenue avec l’acide ascorbique qui est un inhibiteur plus efficace contre la PPO.